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出生后小鼠耳蜗发育过程中高迁移率族蛋白B1的表达分布
刘文静;丁小琼;王旭东;杨军;目的观察高迁移率族蛋白B1(High mobility group box 1,HMGB1)在出生后不同年龄段小鼠耳蜗中的表达分布,探索其功能及意义。方法采用免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜检测HMGB1在出生后第1天(P1)、7天(P7)、12天(P12)、17天(P17)、21天(P21)以及成年小鼠共6个年龄段耳蜗中的表达分布。结果各年龄段小鼠耳蜗中均可见HMGB1的胞核表达,HMGB1胞核表达广泛分布在血管纹和螺旋韧带、耳蜗侧壁的血管、Corti器支持细胞及感觉毛细胞、螺旋缘、螺旋神经元及其周围的神经胶质细胞。免疫荧光双重染色显示HMGB1与Sox2共表达在各组耳蜗Corti器支持细胞及神经胶质细胞。从P1至P12,HMGB1与Sox2表达分布在大上皮嵴。HMGB1在P7开始表达在听觉外周神经纤维和内凹细胞,并从P12起出现表达在少数螺旋神经元的胞浆和胞核,一直持续至成年。分析平均光密度值发现,P1组Deiters细胞HMGB1表达的平均光密度值与P7、P12、P21和成年组之间有明显差异,且差异具有统计学意义(F=4.125、P=0.017*<0.05)。结论 HMGB1在小鼠耳蜗发育过程中的时空表达,表明其在耳蜗发育及听觉功能中发挥十分重要的作用。
PD-L1及CD8~+TIL在前庭神经鞘膜瘤中的表达及意义
尹晓玲;火子榕;严爽;张治华;目的探讨程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)及CD8+肿瘤浸润性淋巴细胞(Tumor infiltrating lymphocyte,TIL)在散发性前庭神经鞘膜瘤(vestibular schwannoma, VS)中的表达,为前庭神经鞘膜瘤免疫靶向治疗提供理论和实验基础。方法回顾性收集2018年11月至2019年4月于上海交通大学医学院附属第九人民医院耳鼻咽喉头颈外科手术治疗的15例散发性VS患者的临床资料及病理蜡块,采用免疫组化法检测15例散发性前庭神经鞘膜瘤手术切除组织中PD-L1及CD8+淋巴细胞表达情况,分析它们之间相关性及与临床病理特征的关系。结果显微镜下观察15例散发性VS组织中有14例(93.3%)PD-L1表达阳性,其中7例(46.7%)为高表达。在15例(100%)样本中均观察到CD8+淋巴细胞的阳性表达,其表达量与PD-L1表达量呈正相关(P=0.02,r=0.82)。结论在散发性VS中存在PD-L1广泛表达,PD-L1表达与CD8~+TIL表达呈正相关,该肿瘤可能对免疫检查点抑制剂的免疫治疗有反应,在未来临床试验中可进一步探索。
颈静脉孔区静脉窦开口的解剖学研究
孙慧颖;高志强;田旭;赵杨;魏兴梅;奥登苏日塔;于姝婷;宋雯洁;冯国栋;目的探讨颈静脉孔区静脉窦开口的特点及与神经的毗邻关系。方法统计分析30例颅骨标本中颈静脉球及近颈静脉球的乙状窦、颈内静脉内静脉窦开口的位置、数量、最长径及其与颅神经的关系。结果全部标本均可观察到岩下窦开口,60%(18/30)为多个开口,90%(27/30)有一较大开口位于颈静脉球前内侧壁,且与第IX、X、XI颅神经关系密切。60%(18/30)标本中可见后髁导静脉的开口,94.4%(17/18)为单个开口,常位于颈静脉球底壁或静脉球与乙状窦交界处。颈静脉球内侧壁可见数量不等的边缘窦、枕窦及岩骨穿支静脉的开口。结论颈静脉球及近颈静脉球的乙状窦、颈内静脉内存在多个静脉窦的开口,行此区手术时应充分止血并仔细检查各个开口,避免肿瘤残留,处理前内侧岩下窦开口时应轻柔操作,避免损伤后组颅神经(IX、X、XI)。
美金刚拮抗阿米卡星对豚鼠螺旋神经节细胞毒性的实验研究
周琦;刘渊;唐安洲;谭颂华;黄训健;尹时华;目的通过圆窗龛局部给药,探讨美金刚对阿米卡星致豚鼠螺旋神经节细胞毒性的拮抗作用。方法将听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)检测结果小于40dBSPL的花色豚鼠共60只,随机分为4组,每组15只。Ⅰ组:空白对照组;Ⅱ组:单纯阿米卡星给药组(肌肉注射阿米卡星);Ⅲ组:人工外淋巴液(artificial perilymph,APL)+阿米卡星给药组(左耳圆窗龛注人APL60μl后,肌肉注射阿米卡星);IV组:美金刚+阿米卡星给药组(左耳圆窗龛注入溶于APL的美金刚5mg/ml,60μl后,肌肉注射阿米卡星)。阿米卡星注射量为400mg/kg/d,连续注射5天,停药14天后,每组动物行ABR阈值检测,将动物处死,取出每组动物左耳蜗。每组随机取6只通过免疫组织化学染色观察耳蜗螺旋神经节caspase3表达情况。剩下6只行原位末端转移酶标记技术(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling assay,TUNEL)法检测螺旋神经节细胞凋亡率。结果给药前,各组动物ABR阈值检测结果均小于40dBSPL。给药后,各组动物左耳ABR阈值结果为:Ⅰ组:37.08±3.34dB SPL,Ⅱ组:90.42±5.42dBSPL,Ⅲ组:91.17±5.37dB SPL,IV组:78.75±6.78dB SPL。免疫组织化学染色显示,Ⅱ组、Ⅲ组动物耳蜗螺旋神经节caspase3表达较Ⅰ组升高(P<0.01)。IV组动物耳蜗螺旋节caspase3表达较Ⅱ组、Ⅲ组降低(P<0.05),较Ⅰ组升高(P<0.01)。TUNEL法检测螺旋神经节细胞凋亡率:Ⅱ组、Ⅲ组动物耳蜗螺旋神经节细胞凋亡率较Ⅰ组明显升高(P<0.001)。IV组动物耳蜗螺旋神经节凋亡率较Ⅱ组、Ⅲ组降低(P<0.01),较Ⅰ组升高(P<0.001)。结论 (1)美金刚经圆窗龛局部给药后肌肉注射阿米卡星,豚鼠ABR阈值低于单纯肌肉注射阿米卡星ABR阈值。(2)美金刚经圆窗龛局部给药后肌肉注射阿米卡星,螺旋神经节caspase3表达较单纯肌肉注射阿米卡星减少。(3)美金刚经圆窗龛局部给药后肌肉注射阿米卡星,螺旋神经节凋亡较单纯肌肉注射阿米卡星减少。美金刚经圆窗龛给药对阿米卡星螺旋神经节细胞毒性有一定拮抗作用。
大同市特教学校非综合征性聋分子病因学分析——GJB2 235delC突变和线粒体DNA 12SrRNA A1555G突变筛查报告
孙栓柱;杨淑芝;戴朴;刘新;于飞;孙勍;袁永一;朱庆文;徐延军;刘丽贤;袁慧军;目的进行山西省大同地区重度耳聋的分子流行病学调查。方法对山西省大同市特殊教育学校152 名耳聋学生进行遗传性耳聋问卷调查、全面的体格检查、耳鼻咽喉专科检查以及包括纯音测听和声导抗在内的听力学评估。对148名非综合征型感音神经性耳聋患者分别进行线粒体DNA 12SrRNA基因A1555G点突变和GJB2基因235delC突变的限制性内切酶分析。结果 3例(2．03％)存在线粒体DNA 12SrRNA基因A1555G点突变,16例 (10．81％)存在GJB2基因235delC纯合突变,21例(14．19％)存在GJB2基因235delC杂合突变,能够明确进行基因诊断者占27．03％。结论山西省大同地区非综合征型耳聋患者存在较高的GJB2基因235delC突变发生率,而线粒体DNA 12SrRNA基因A1555G突变发生率低于全国平均水平。通过聋病分子流行病学调查,提示27．03％的非综合征型耳聋患者具有明确或强烈的遗传倾向,对于大同地区耳聋的预防、治疗及康复有着较好的意义。
《关于非综合征型遗传性听损伤家系遗传学及听力学描述术语建议案》
王秋菊<正> 由Dr.Van camp等人于2003年7月11日倡导此建议案。该建议案将遗传性非综合征型听损伤研究中以家系为研究背景进行研究时所应用的遗传学及听力学描述术语进行了规范、统一,于2003年9月23日公布。目的是在全球范围内,在研究人员、遗传学家、听力学家及耳鼻咽喉医生中达成共识,用
耳内镜下鼓膜切开置管治疗分泌性中耳炎技法探讨
周卫东;周建业;王晓萍;费捷;庄强尔;李继红;目的介绍在耳内镜下进行鼓膜切开置管手术的技法。方法探讨95例(119耳)分泌性中耳炎病例在耳内镜下进行鼓膜切开置管的技法。结果耳内镜下鼓膜切开置管术均一次完成,手术更为精确,操作更为简单。结论在耳内镜下进行鼓膜切开置管手术优于在显微镜下手术。
儿童有无平台短纯音诱发听性脑干反应研究
刁文雯;倪道凤;商莹莹;李奉荣;邹琦娟;朱莹莹;目的比较有平台与无平台短纯音诱发的儿童听性脑干反应(Auditory Brain Stem Response,ABR)反应阈之间的相关性,选择更优化的频率特异性ABR刺激信号。方法应用SmartEP听觉诱发电位仪(美国IHS公司)记录0～4岁儿童短声、有平台及无平台短纯音诱发ABR各频率反应阈,共26例(17男/9女)41耳。结果 0.5kHz、1kHz、2kHz、4kHz有平台短纯音ABR反应阈与无平台短纯音ABR反应阈的线性相关系数分别为0.949、0.968、0.979、0.936,前者比后者反应阈分别高(5.0±7.6)、(9.4±5.8)、(8.2±5.2)、(7.6±10.3)dB,差异有统计学意义(t值分别为3.397、8.060、7.915、3.682,P值均<0.01)。极重度听力损失耳有平台短纯音各频率ABR反应阈值引出率均高于无平台短纯音。结论本实验室应用SmartEP听觉诱发电位仪评估儿童听力时,总体上,在测试非极重度听力损失患儿时,无平台短纯音诱发ABR优于有平台短纯音;但本仪器后者可提供更高强度的声刺激,以用于极重度听力损失耳。
感音神经性聋耳蜗病理改变及其干预措施
宋炳楠;李永新;<正>神经兴奋在所有感觉通路发育及功能维持中发挥重要作用。感音神经性聋(SNHL)患者,减弱或丧失了从耳蜗向中枢的神经传导,使听觉传导通路发生一系列退行性改变。人工耳蜗的应用以及生长因子、抗氧化剂等用于内耳损伤的实验研究,都以不同方式和程度影响着这种退变。
羊水干细胞拟胚体与耳蜗基底膜共培养向神经元分化的可行性
宗凌;姜鸿彦;目的探讨人来源的羊水干细胞以拟胚体样结构与小鼠耳蜗基底膜组织共培养,分化为神经元的可行性。方法分离培养人来源的羊水干细胞,悬滴法培养,观察羊水干细胞拟胚体形成情况;免疫荧光检测拟胚体细胞干性标记物的表达;将拟胚体与小鼠基底膜组织共培养,不添加神经生长因子及神经元信号诱导因子,观察拟胚体向神经元分化情况。结果羊水干细胞经悬滴培养可形成拟胚体样结构,表达神经干细胞标记物Sox2、Nestin;与小鼠耳蜗基底膜组织共培养,拟胚体细胞有神经元标记物Tuj1表达,但无神经元形态特征。结论羊水干细胞体外悬滴后可形成形态均一且具有神经干性的拟胚体,与耳蜗基底膜组织共培养,不能诱导拟胚体细胞向形态典型的神经元分化。