下载排行
基因芯片技术在非综合征性耳聋快速基因诊断中的应用研究
王国建;戴朴;韩东一;李彩霞;张地;韩冰;康东洋;张昕;目的应用耳聋基因芯片对非综合征性感音神经性耳聋患者进行分子病因学研究,评估其在快速耳聋基因诊断中的可行性。方法采集158名来自北京第三聋哑学校的非综合征性耳聋学生的外周血,提取基因组DNA,用耳聋基因芯片检测四个国人中常见的耳聋相关基因中的9个热点突变,包括GJB2(35delG,176del16bp,235delC及299_300delAT),GJB3(538C>T及547G>A),SLC26A4(IVS7-2A>G、2168A>G)和线粒体DNA 12S rRNA(A1555G)。同时,应用酶切法或直接测序法分别对线粒体12SrRNA A1555G突变,以及GJB2、SLC26A4基因编码区序列进行检测,以验证基因芯片结果的准确性。结果在158名耳聋患者中,基因芯片方法共检出67例携带致聋突变(42.41%)。其中,线粒体DNA 12S rRNA A1555G突变5例(3.16%);GJB2基因突变39例(24.68%),包括235delC纯合突变24例,235delC和299_300delAT复合杂合突变7例,235delC单杂合突变5例,299_300delAT单杂合突变2例,35delG单杂合突变1例;SLC26A4基因突变22例(13.92%),包括IVS7-2A>G纯合突变5例,IVS7-2A>G和2168A>G复合杂合突变5例,IVS7-2A>G单杂合突变11例,2168A>G单杂合1例;另外还有1例患者检出299_300delAT和IVS7-2A>G双杂合突变。未检出GJB3基因突变。除两例纯合235delC被判读为杂合外,基因芯片的结果同酶切及测序方法结果一致,后者的阳性患者检出率为70例(44.3%),与芯片检测结果相比无统计学差异(P=0.250)。经探针优化后,上述两例误判的235delC样品的芯片检测结果均与测序方法一致,同时经测序证实的其他22例235delC纯合突变样品验证,基因芯片的结果均与测序结果一致。结论针对国人常见耳聋相关基因热点突变设计的耳聋基因芯片对非综合征性重度和极重度耳聋患者的突变检出率高(42.41%)。与传统方法相比,它具有快速、高通量、高准确性、低成本等特点,能够满足临床耳聋基因检测的要求;且其操作简单,易于标准化,适于推广,显示出广阔的临床应用前景。
前庭功能检查专家共识(二)(2019)
贾宏博;刘波;杜一;刘博;王武庆;韩军良;蒋子栋;张怀亮;郭维维;吴子明;<正>前庭功能检查是借助一定技术方法,通过特定的自发或诱发试验,对前庭系统生理功能进行的定性或定量评估,旨在明确病变侧别和部位,了解前庭神经系统功能受损程度,是临床上眩晕、平衡障碍等疾病诊治和特殊职业人群选拔的必要手段。国内各种前庭功能检查方法和技术正在普及,规范前庭功能检查方法和技术,对于其临床应用至关重要。中国医药教育协会眩晕专业委员会联合中国康复医学会眩晕与康复专业委员会、中西医结合学
氨基糖苷类抗生素耳毒性研究
丁大连;Richard Salvi;由于抗菌谱广和价格便宜等原因,氨基糖苷类抗生素被广泛应用于临床。然而氨基糖苷类抗生素的耳毒性和肾毒性却使其在临床应用中受到一定限制。氨基糖苷类抗生素在耳蜗毛细胞中的主要积聚部位是线粒体和溶酶体。氨基糖苷类抗生素引起的细胞内氧自由基活动增强是毛细胞损害的重要因素之一,因此局部或者全身应用氧自由基清除剂可以保护耳蜗免受氨基糖苷类抗生素的损害。钙激活的蛋白酶在氨基糖苷类抗生素引起的毛细胞破坏过程中同样扮演了重要的角色,因此抑制钙激活蛋白酶的活性也能有效保护耳蜗毛细胞。急性氨基糖苷类抗生素耳中毒引起的毛细胞破坏大都死于细胞凋亡,其凋亡原因主要是因为线粒体被药物特异性结合并破坏后,其内部的细胞色素C被释放到细胞质中,因而刺激了Caspase-9并激发其下游的Caspase-3,从而导致毛细胞的程序化死亡。与此不同的是,慢性氨基糖苷类抗生素耳中毒引起的毛细胞破坏不仅包括细胞凋亡而且涉及细胞坏死。在氨基糖苷类抗生素引起的毛细胞坏死过程中,溶酶体的超载破裂最终造成毛细胞自溶性坏死是其典型特征。氨基糖苷类抗生素对螺旋神经节没有直接的毒性作用,但是在耳蜗毛细胞被破坏之后,螺旋神经节往往由于缺乏神经营养因子而发生延迟性神经元死亡,应用转基因技术将神经营养因子基因片段转染到耳蜗支持细胞使之产生分泌神经营养因子的功能,可以有效减轻延迟性神经元死亡的发生率。
顺铂及其耳毒性
丁大连;亓卫东;张梅;王苹;蒋海燕;Richard Salvi;顺铂是一种用于化疗的铂制剂,在临床上广泛应用于抗肿瘤治疗。然而由于顺铂所具有的肾毒性和耳毒性以及神经毒性等毒副作用,致使其临床应用受到一定的限制。顺铂损害耳蜗的三个主要靶目标分别是血管纹和毛细胞以及螺旋神经节,这三个靶目标在顺铂的作用下都以细胞凋亡的方式实现其程序化自我毁灭,因此顺铂耳中毒模型是一个典型的内耳细胞凋亡模型。顺铂造成的细胞内氧自由基活动增加和抗氧化酶类的活性丧失是产生细胞损害的重要因素之一,因而抗氧化治疗可有效降低顺铂对耳蜗中上述三个靶目标的破坏程度。顺铂在Caspase(半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶)径路上激发的毛细胞凋亡是首先启动Caspase-8的活动,说明毛细胞膜表面的细胞死亡因子受体是顺铂诱导毛细胞凋亡的一根导火索;螺旋神经节细胞的凋亡却是被顺铂同时启动了Caspase-8和Caspase-9,因此螺旋神经节细胞的凋亡不但是因为细胞膜表面的死亡因子受体因受顺铂刺激而发出凋亡的信号,而且还会被从线粒体释放出的细胞色素C启动其凋亡自毁程序。肿瘤抑制基因p53是出现在顺铂耳中毒早期的一个促使细胞凋亡的重要"杀手",应用Superarray技术发现顺铂激发的耳蜗毛细胞和螺旋神经节凋亡基因主要涉及p53,肿瘤坏死因子家族,Death domain family(死亡结构域家族),Bcl-2family,Card family(Caspase相关的招募域家族),和GTP signal transdution(三磷酸鸟苷信号转导)等多条凋亡通路,其中p53信号通路是顺铂诱导毛细胞和螺旋神经节凋亡的主线,因此应用p53抑制剂-Pifithrinα可以通过有效阻止p53的活动而减轻顺铂诱导的毛细胞凋亡。分裂素激活的蛋白激酶在顺铂诱导的内耳细胞凋亡过程中也扮演了重要的角色,应用PD98059可以通过暂时抑制分裂素激活的蛋白激酶活性和p53磷酸化以及Caspase的活动延迟耳蜗毛细胞凋亡的起始阶段,但不能完全阻止病变的扩展,因而PD98059对顺铂引起的耳蜗毛细胞凋亡仅具有短期保护效应。
听神经瘤临床研究新进展
吴皓;汪照炎;听神经瘤来源于内听道内前庭神经施旺细胞,是内听道、桥小脑角区域最为常见的良性肿瘤。经过多代人的努力,听神经瘤外科经历了由挽救生命到微创个体化治疗的发展。但听力丧失、面瘫等术后并发症仍明显影响患者的生活质量。近年来,由于对听神经瘤诊疗水平的进一步提高,听神经瘤的治疗目标正进一步转向神经功能完整保留、提高生活质量等方面。本文将介绍近年来国内外听神经瘤的主要研究进展,并提出听神经瘤诊治的未来研究方向。
耳鸣中枢机制的基础研究进展
兰家辉;李明;张剑宁;耳鸣发病机制不明,外周听觉系统损伤可能是耳鸣的起因,但随着研究深入,中枢化机制逐渐成为近年来研究的热点。基于耳鸣动物模型开展的基础研究在耳鸣机制研究中占据重要地位。与耳鸣相关的脑区逐渐指向耳蜗核、下丘、听皮层等听觉通路上的重要区域,上述区域的病理变化可能是耳鸣形成和维持的原因;边缘系统作为与情绪相关的听觉外系统,可能参与耳鸣中枢调节的复杂过程。本文综述近年来涉及耳鸣相关脑区的基础研究进展,为探讨耳鸣中枢机制提供借鉴。
周围性面瘫
韩维举;韩东一;<正>面神经是人体内居于骨管中最长的神经,其穿行骨管约3.1～3.3cm,是最易遭受损伤的神经。从大脑皮质的中央前回到面神经末梢之间任何部位的外伤、炎症、肿瘤、病毒及颞骨手术和变性等病变均能引起面部表情肌的部分或完全麻痹,但大多数面瘫是由颞骨内病变所引起的周围性面瘫。
耳鸣严重程度评估方法的研究
刘蓬;龚慧涵;阮紫娟;目的探讨合理评估耳鸣严重程度的方法。方法对219例初诊耳鸣患者分别应用耳鸣程度评分法及THI(tinnitus handicap inventory,THI)评分法进行严重程度评估,对两种方法评估的总分及其子项目评分进行相关性分析。结果耳鸣程度评分法与THI评分法的相关系数为0.73(P<0.001),按耳鸣程度评分法进行的严重程度分级与THI评分呈正相关,耳鸣程度评分法中耳鸣对情绪的影响及耳鸣对工作和生活、睡眠的影响分别与THI评分中的情绪性评分及功能性评分具有较高的相关性(相关系数分别为0.674、0.703)。耳鸣程度评分法中耳鸣对情绪、工作和生活、睡眠的影响及严重性自我评分4个子项目与总分的相关性较大,耳鸣出现的环境及持续时间2个子项目与总分的相关性较小。结论耳鸣程度评分法与THI评分法的评估理念基本一致,结果相似,但前者更为简单实用,今后可进一步改良部分指标的权重。
国内高压氧联合药物治疗突发性耳聋临床疗效的Meta分析
库薇;刘业海;吴静;王强;童步生;段茂利;目的评价近几年来国内高压氧联合药物综合疗法治疗突发性耳聋的临床疗效。方法检索2008~2012年近五年来中国学术期刊、中国数字图书馆、维普信息资源系统、超星数字图书馆、中国生物医学文献数据库、万方数据库中关于高压氧联合药物综合治疗突发性耳聋的随机对照研究,对符合纳入标准的文献进行方法学的评价,并用RevMan5.1软件对符合质量标准的随机对照研究进行Meta分析。结果纳入了20个随机对照研究,患者总数为2554例,其中有1347例接受高压氧联合药物治疗,即治疗组,另外1207例接受药物单纯疗法,即对照组。通过Meta分析表明治疗组比对照组的临床疗效显著(P<0.00001),而且早期使用高压氧治疗比晚期使用的临床疗效显著(P<0.00001)。结论在突发性耳聋的治疗过程中,应用高压氧联合药物综合疗法比药物单纯疗法的效果要显著,而且引入高压氧治疗的时间越早效果越好。
老年性耳聋的防治进展
刘宸箐;侯晓丰;翟所强;于宁;目的老年性耳聋已成为影响老年人生活质量的重要因素,通过本篇综述可以更好地了解老年性耳聋防治进展。方法在Pubmed,Science,Medline,CINAHL数据库搜索老年性耳聋预防、治疗的相关文献并进行系统分析、归纳总结。结果本文共引用了48篇文献资料,发现老年性耳聋在传统防治方法上近10年并无太大进展;而听觉辅助装置,如助听器、人工耳蜗、人工中耳等近10年发展很快并且已广泛应用于临床;干细胞移植技术及基因治疗技术对老年性耳聋的防治的基础研究也取得很大进步。结论虽然目前在老年性耳聋的防治方面已取得很多成就,但仍任重道远;基因治疗及干细胞移植技术在老年性耳聋防治上拥有广阔前景。